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内毒素去除试剂盒

内毒素去除试剂盒

商家询价

产品名称: 内毒素去除试剂盒

英文名称: Endotoxin Removal Kit

产品编号: 60404ES03

产品价格: 0

产品产地: Yeasen

品牌商标: Yeasen

更新时间: 2023-08-17T13:40:59

使用范围: null

翌圣生物科技(上海)股份有限公司
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产品信息

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价格(元)

Endotoxin Removal Kit 内毒素去除试剂盒

60404ES03

1Kit

4

1680.00

产品描述

细菌内毒素可引起机体免疫功能受损,严重者可引发脓毒性休克,急性呼吸窘迫综合症,弥散性血管内凝血,全身炎症反应综合症或致命性多器官功能衰竭等。因此对于用于疾病治疗的基因药物、蛋白药物、单抗克隆药物、治疗性疫苗、小分子化学药物等生物制品必须通过一定的方法去除内毒素。

翊圣提供的内毒素去除树脂以修饰过的多粘菌素BPMB)为配体,可高效特异的将生物制品中内毒素去除,经纯化样品最终的内毒素水平可<0.1EU/ml,适合于蛋白,多肽,抗体,多糖等多种形式样品的纯化。本品以预装柱的形式提供,另附带用于去除内毒素的其他试剂(如相关缓冲液)以及无热源耗材等,方便客户使用。

产品性质

基质(Matrix

4%琼脂糖微球

配体(Ligand

修饰的多粘菌素BPMB

孔径(Bead size

80-100μm

载量(Capacity

2,000,000EU/ml树脂

pH稳定范围(pH range

5-10

离子范围(Ion Range

0.1-0.5M NaCl

平衡缓冲液(Equilibration Buffer

PBSpH8.0

耐受试剂(tolerant reagent

20% DMSO20% 乙醇20% 甘油 0.05% 吐温-2010mM DTT1M 尿素300mM咪唑等

产品组分

组分编号

组分名称

规格

60404-A

Endotoxin Removal Chromatography Column 内毒素去除树脂预装柱

2ml

60404-B

Regeneration Buffer 再生缓冲液

125ml

60404-C

Equilibration Buffer平衡缓冲液

125ml

60404-D

Pyrogen-free Tubes无热源接收管

1包(3/包)

60404-E

Pyrogen-free Tips无热源吸头(1ml

3包(4/包)

运输和保存方法

冰袋运输。4保存,有效期至少1年。

使用方法

1. 样品处理:多粘菌素B和内毒素是通过静电作用,离子作用,亲水作用和分子间相互作用等多种因素共同作用的结果,因此实验中存在的若干因素都可能会影响内毒素去除效率,如:缓冲液的pH值,内毒素浓度,内毒素与树脂的接触时间,离子强度,温度以及样品的特性等。其中样品pH值和离子强度对于内毒素的去除效率影响尤其重要,纯化前可用处理过的氯化钠,0.1MNaOH0.1M HCl来调节离子强度或pH值。

【注】 虽然结合内毒素的pH范围在5-10,但是7-8pH范围是纯化的最佳范围。

 合适的离子浓度可降低非特异性吸附,保持0.15-0.5M NaCl的条件可以得到一个较好的去除效果。

2. 活化树脂:将预装柱置于铁架台,垂直固定,去除顶部盖子,打开流速控制器,使保护液在重力作用下流干,加入5ml再生缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.25ml/min(或10/min),待再生缓冲液流干后再加入5ml再生缓冲液,再重复操作2次,确保体系保持无热源(即内毒素)存在。即使是第一次使用也必须进行这一步操作。该步操作大约需要60min完成。

3. 平衡树脂:活化完毕后加入6ml的平衡缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.5ml/min,流干平衡缓冲液,再按此操作重复2次。这步操作大约需要40min完成。

4. 内毒素去除将流速控制器关闭,使用无热源枪头将样品加入,打开控制器,控制流速不高于0.25ml/min,流出液体积达到1.5ml后,使用无热源接收管接收样品,样品流干后,再加入1.5ml-3.0ml的平衡缓冲液淋洗,收集淋洗液。检测样品浓度及内毒素水平。

5. 再次使用:如果流出样品内毒素水平未能达到预期值,需要将预装柱按照步骤2重新再生,然后上样纯化。

6. 保存条件:如果预装柱用完后需要保存,先用10ml平衡缓冲液平衡柱子,待平衡液流干,加入1.5ml的再生缓冲液(含0.02%的叠氮化钠)。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

附表

问题

可能原因

解决方法

去除效率低

样品与树脂接触时间太短

降低样品流速,或通过低温孵育来提高结合效率

样品的pH值没有在7-8之间

调节pH值至7-8

去除或检测系统受到外来因素污染

使用无热源的实验仪器,保证体系不受污染

内毒素与目的蛋白结合太牢固

 优化样品的pH值,使它们解离;

 增加样品与树脂的接触时间

样品损失高

样品通过非特异性作用结合在树脂上

增加样品和平衡缓冲液中NaCl的含量

目的蛋白与内毒素结合牢固,一起结合在树脂上

 优化样品的pH值,使它们解离;

 增加样品与树脂的接触时间

样品被污染

树脂用于处理过其他的样品

尽量避免使用同一个预装柱处理不同样品。如果无法避免,可以在处理一个样品之后,用10-20ml 2M NaCl淋洗树脂,然后再处理另外一种样品


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