内毒素去除试剂盒
产品名称: 内毒素去除试剂盒
英文名称: Endotoxin Removal Kit
产品编号: 60404ES03
产品价格: 0
产品产地: Yeasen
品牌商标: Yeasen
更新时间: 2023-08-17T13:40:59
使用范围: null
- 联系人 : 李自转
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- 所在区域 : 上海
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- 邮箱 : lizizhuan@yeasen.com
产品信息
产品名称
产品编号
规格
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价格(元)
Endotoxin Removal Kit 内毒素去除试剂盒
60404ES03
1Kit
4℃
1680.00
产品描述
细菌内毒素可引起机体免疫功能受损,严重者可引发脓毒性休克,急性呼吸窘迫综合症,弥散性血管内凝血,全身炎症反应综合症或致命性多器官功能衰竭等。因此对于用于疾病治疗的基因药物、蛋白药物、单抗克隆药物、治疗性疫苗、小分子化学药物等生物制品必须通过一定的方法去除内毒素。
翊圣提供的内毒素去除树脂以修饰过的多粘菌素B(PMB)为配体,可高效特异的将生物制品中内毒素去除,经纯化样品最终的内毒素水平可<0.1EU/ml,适合于蛋白,多肽,抗体,多糖等多种形式样品的纯化。本品以预装柱的形式提供,另附带用于去除内毒素的其他试剂(如相关缓冲液)以及无热源耗材等,方便客户使用。
产品性质
基质(Matrix)
4%琼脂糖微球
配体(Ligand)
修饰的多粘菌素B(PMB)
孔径(Bead size)
80-100μm
载量(Capacity)
>2,000,000EU/ml树脂
pH稳定范围(pH range)
5-10
离子范围(Ion Range)
0.1-0.5M NaCl
平衡缓冲液(Equilibration Buffer)
PBS,pH8.0
耐受试剂(tolerant reagent)
20% DMSO,20% 乙醇,20% 甘油; 0.05% 吐温-20,10mM DTT;1M 尿素;300mM咪唑等
产品组分
组分编号
组分名称
规格
60404-A
Endotoxin Removal Chromatography Column 内毒素去除树脂预装柱
2ml
60404-B
Regeneration Buffer 再生缓冲液
125ml
60404-C
Equilibration Buffer平衡缓冲液
125ml
60404-D
Pyrogen-free Tubes无热源接收管
1包(3个/包)
60404-E
Pyrogen-free Tips无热源吸头(1ml)
3包(4个/包)
运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存,有效期至少1年。
使用方法
1. 样品处理:多粘菌素B和内毒素是通过静电作用,离子作用,亲水作用和分子间相互作用等多种因素共同作用的结果,因此实验中存在的若干因素都可能会影响内毒素去除效率,如:缓冲液的pH值,内毒素浓度,内毒素与树脂的接触时间,离子强度,温度以及样品的特性等。其中样品pH值和离子强度对于内毒素的去除效率影响尤其重要,纯化前可用处理过的氯化钠,0.1M的NaOH或0.1M HCl来调节离子强度或pH值。
【注】:① 虽然结合内毒素的pH范围在5-10,但是7-8的pH范围是纯化的最佳范围。
② 合适的离子浓度可降低非特异性吸附,保持0.15-0.5M NaCl的条件可以得到一个较好的去除效果。
2. 活化树脂:将预装柱置于铁架台,垂直固定,去除顶部盖子,打开流速控制器,使保护液在重力作用下流干,加入5ml再生缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.25ml/min(或10滴/min),待再生缓冲液流干后再加入5ml再生缓冲液,再重复操作2次,确保体系保持无热源(即内毒素)存在。即使是第一次使用也必须进行这一步操作。该步操作大约需要60min完成。
3. 平衡树脂:活化完毕后加入6ml的平衡缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.5ml/min,流干平衡缓冲液,再按此操作重复2次。这步操作大约需要40min完成。
4. 内毒素去除:将流速控制器关闭,使用无热源枪头将样品加入,打开控制器,控制流速不高于0.25ml/min,流出液体积达到1.5ml后,使用无热源接收管接收样品,样品流干后,再加入1.5ml-3.0ml的平衡缓冲液淋洗,收集淋洗液。检测样品浓度及内毒素水平。
5. 再次使用:如果流出样品内毒素水平未能达到预期值,需要将预装柱按照步骤2重新再生,然后上样纯化。
6. 保存条件:如果预装柱用完后需要保存,先用10ml平衡缓冲液平衡柱子,待平衡液流干,加入1.5ml的再生缓冲液(含0.02%的叠氮化钠)。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
附表
问题
可能原因
解决方法
去除效率低
样品与树脂接触时间太短
降低样品流速,或通过低温孵育来提高结合效率
样品的pH值没有在7-8之间
调节pH值至7-8
去除或检测系统受到外来因素污染
使用无热源的实验仪器,保证体系不受污染
内毒素与目的蛋白结合太牢固
① 优化样品的pH值,使它们解离;
② 增加样品与树脂的接触时间
样品损失高
样品通过非特异性作用结合在树脂上
增加样品和平衡缓冲液中NaCl的含量
目的蛋白与内毒素结合牢固,一起结合在树脂上
① 优化样品的pH值,使它们解离;
② 增加样品与树脂的接触时间
样品被污染
树脂用于处理过其他的样品
尽量避免使用同一个预装柱处理不同样品。如果无法避免,可以在处理一个样品之后,用10-20ml 2M NaCl淋洗树脂,然后再处理另外一种样品
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产品名称
产品货号
规格
价格(元)
1486.00