胶原蛋白（Collagen）是一种高分子功能性蛋白质，也是结缔组织和内脏器官外基质的主要成分，比如I型胶原在骨、跟腱、皮肤、血管壁中含量丰富；II型胶原在透明软骨中含量丰富；III型胶原在皮肤、血管内膜、肠道中含量丰富，弹性较好。不同类型的胶原蛋白在医疗、美容、医学和科学研究领域有着重要的应用。

其中I型胶原蛋白（Collagen, Type I）结构上是由2个α1链和1个α2链组成300 nm长的异源多聚体。当用作凝胶时，胶原蛋白有助于体外培养并增强细胞特异性形态和功能的表达。翌圣生物生产的I型鼠尾胶原蛋白来源于天然小鼠鼠尾巴和SD大鼠鼠尾巴，制作的胶原蛋白产品溶于0.02M HAc溶液，无菌包装。可用于薄层以促进附着，应用包括研究肿瘤细胞侵袭和迁移，单核细胞，巨噬细胞的培养或分化研究，以及粒细胞和巨噬细胞的放射自显影研究，以及维持肝细胞功能，分化状态和肝细胞基因转录水平的升高等研究。

翌圣生物提供来自于大鼠和小鼠尾的I型胶原蛋白，不仅产量足、纯度高、蛋白浓度丰富，品质更佳，且经过具体的应用验证，得到结果与预期一致。

生产质控

无尘车间内生产，保证洁净度；

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来源小鼠和SD大鼠鼠尾巴；

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单批产量达3L，满足大规模使用需要；

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通过细胞培养测试(包括三维胶细胞培养)；

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电泳结果蛋白浓度＞90 %（SDS-PAGE）；

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产品为无菌溶液，无支原体污染。

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应用方法

 01

薄层包被程序

【注意】：包被浓度为5-10 µg/cm2，推荐浓度可首选5 µg/cm2。建议根据具体的细胞培养系统进行优化。

1）胶原蛋白I用0.02 M乙酸稀释配置50 μg/ mL工作液，胶原蛋白I不溶于中性pH溶液；

2）以5 µg/cm2涂布培养皿，例如：35 mm的培养皿的表面积约为10 cm2，1~2 mL的工作液足以覆盖此皿；

3）室温孵育1小时；

4）小心吸取剩余溶液，用PBS或无血清培养基洗涤以除去多余乙酸；

5）组织培养皿包被后可立即使用，也可风干，在2-8℃无菌条件下可贮存长达一周。

02

胶凝程序

胶原蛋白I按以下步骤使其pH达到弱碱性时凝胶

1）将无菌5 cm左右的纱布海绵贴在150 mm培养皿的盖子上来制备氨蒸气室。用氢氧化铵使纱布饱和，把盖子放在150 mm的培养皿上，暂放置一边；

2）将胶原蛋白I均匀涂布在要包被物的表面上，厚度可以根据需要改变，胶原蛋白I（50-100 μL）足以涂覆22 mm的盖玻片。对于直径100 mm的培养皿，每个加入约6 mL; 对于60 mm培养皿添加约2.3 mL，对于35 mm培养皿添加约1 mL；

3）将涂有胶原蛋白的盖玻片或带有盖子的培养皿转移到氨蒸气室并暴露三分钟；

4）在无菌蒸馏水中（35 mm培养皿加5 mL等）浸泡涂布的盖玻片或培养皿30 min。吸取原蒸馏水并加0.5-1.0 mL无菌蒸馏水，放置在层流罩中过夜；

5）吸出蒸馏水，用含血清的平衡盐缓冲液溶液代替并保存在2-8°C。

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