如何10min完成细胞活力检测 如何快速精确的检测细胞活力,科研人员一直在探寻新的检测手段。ATP 是细胞内最重要的能量分子,可以用来衡量细胞新陈代谢水平并与活细胞数目具有良好的线性关系,可通过ATP 含量反应活细胞的数目。本试剂盒是借助ATP 依赖的荧光素酶催化的荧光素发光反应,通过化学发光信号测定细胞内ATP 含量,从而检测细胞活力或定量检测活细胞数目并且具有灵敏度高、线性范围宽,适合高通量筛选检测。
图:ATP Luminescent检测原理图
表:不同细胞活力检测方法的优劣对比
方法 |
甲䐶水溶性 |
灵敏度 |
检测时间 |
检测指标 |
细胞毒性 |
试剂稳定性 |
高通量检测 |
使用便捷度 |
MTT法 |
差 |
++ |
较长 |
A560-600nm |
高,细胞形态消失 |
+ |
++ |
+ |
WST-1法 |
好 |
+++ |
较短 |
A420-480nm |
低,细胞形态不变 |
++++ |
++++ |
+++ |
CCK-8法 |
好 |
+++ |
较短 |
A420-480nm |
低,细胞形态不变 |
+++++ |
++++ |
++++ |
Calcein AM法 |
不涉及 |
++++ |
很短 |
荧光 |
低,细胞形态不变 |
++++ |
++++ |
+++++ |
EdU法 |
不涉及 |
+++++ |
较短 |
荧光 |
细胞被固定 |
++++ |
+++ |
++ |
ATP酶法 |
不涉及 |
+++++ |
极短 |
化学发光 |
细胞被裂解 |
++++ |
+++++ |
+++++ |
1、操作简单,检测速度快
将试剂与待测样品按照同体积混合反应10min即可上机检测,无需洗涤换液等步骤。
图:ATP Luminescent试剂盒检测流程图
2、检测灵敏度高,线性范围宽
能在10~10万个细胞范围内测定并呈现良好的线性关系。下图是Yeasen产品与国外P*公司同类产品对比测试。
a.线性测试
图:对由低到高不同细胞数及不同细胞类型,均展现出极优的线性度
b.信号强度测试
图:对于不同的检测时间,荧光信号均强于进口品牌P公司。信号稳定性也更好。
3、稳定性好
反复冻融5次对检测效果基本无影响、4℃保存3天对检测效果无显著影响、室温保存1天,仍可保留80%以上的检测效果、本产品即使仅保留约50%的检测效果,仍可以满足各种常规检测
Q:ATP的细胞活力检测试剂,可以在荧光显微镜下观察拍照吗?
A:不可以,该试剂盒的检测原理是化学发光法。
Q: 试剂盒可以检测ATP的量吗?是否有标准品?
A: 是检测活细胞类atp的量,与cck8类似,用酶标仪测发光值,没有标准品。
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